Kao nutrijent koji je potreban za rast ćelija, uloga seruma u ćelijskoj kulturi je očigledna, a kvalitet i sterilnost seruma su takođe ključ za određivanje uspeha eksperimenta. Dakle, kako deaktivirati serum? To zahtijeva korištenje bočica sa serumom.
Koraci inaktivacije seruma su sljedeći:
1. Odaberite bočicu koja je ista kao bočica sa serumom kao i kontrolnu bočicu, sipajte istu količinu destilovane vode kao i serum u kontrolnu bočicu i izmjerite temperaturu.
2. Podešavanje temperature. U bocu kontrolne grupe stavite dva živina termometra i stavite ih u vodeno kupatilo. Kada termometar pokaže 56 stepeni, podesite temperaturu vodenog kupatila za kalibraciju na 56 stepeni.
3. Stavite bočicu sa serumom i kontrolnu bočicu zajedno u vodeno kupatilo, podesite temperaturu na 56 stepeni i kupajte se u vodenom kupatilu pola sata. Nakon inaktivacije, podijelite ih u boce, napravite aseptične eksperimente i pohranite ih na -70--20 stepeni.
4. Promatrati boju i prozirnost smrznutog seruma, ako je boja crvenkasta ili je boja svjetlija sa taloženjem, to znači da kvalitet seruma nije dobar, pa je potrebno odabrati kvalitetan serum za inaktivaciju .
5. Upotreba seruma treba izbjegavati ponovno odmrzavanje, što će povećati vjerovatnoću kontaminacije seruma i smanjiti kvalitet seruma. Kada se više puta odmrznuti serum istaloži, to znači da je serum nedostupan ili je izuzetno lošeg kvaliteta.
6. Kako bi se osigurala stabilnost eksperimentalnih rezultata, osigurajte da se serum dobro protrese prilikom podjele bočice, a zatim podijelite bočicu i pokušajte koristiti isti serum kako biste osigurali princip ujednačenih varijabli.
Gore navedeni su specifični koraci inaktivacije seruma korištenjem boca seruma, ali je vrijedno napomenuti da u većini ćelijskih kultura nije potrebna toplinska inaktivacija seruma. U mnogim slučajevima, toplotna inaktivacija ne poboljšava rast ćelija, već uništava serum i povećava precipitaciju. Osim ako literatura ne ukazuje da se inaktivirani serum mora koristiti za ćelije, korak inaktivacije seruma toplinom se općenito može izostaviti za ćelijsku kulturu.
