Princip detekcije nukleinske kiseline

Mar 18, 2022 Ostavi poruku

Princip detekcije nukleinskih kiselina

Ovaj komplet je prethodno obložen novim rekombinantnim antigenom gena za koronavirus (2019-nCoV)

pločicu, i sa enzimom označenim anti-humanim IgA monoklonskim antitijelom kao markerom, korištenjem ELISA indirektne metode

Za kvalitativno otkrivanje novog IgA antitijela na koronavirus (2019-nCoV) u ljudskom serumu.

Nakon što je reakcioni kompleks dodat u supstrat TMB, reakcija je prekinuta i OD svake jažice je izmeren na talasnoj dužini od 450 nm.

Veličina OD vrijednosti je proporcionalna sadržaju antitijela koje treba otkriti.

【Uzorak zahtjeva】

1. Koristite svježe uzorke krvi. Ako ih trebate sačuvati, možete ih ohladiti na 2~8 stepeni 48 sati ili ih zamrznuti na -20 stepeni.

live. Izbjegavajte ponovno zamrzavanje i odmrzavanje (više od 3 puta).

2. Izbjegavajte korištenje rastvorljivih, zamućenih ili masnih uzoraka.

3. Ako uzorak treba da se transportuje, treba ga držati na 2~8 stepeni ili zamrznuti.

4. Izbjegavajte dodavanje antikoagulansa ili zaštitnih agenasa ili konzervansa uzorku, kako ne biste uticali na rezultate testa.

【Način inspekcije】

1. Izvadite komplet iz frižidera i uravnotežite ga na sobnoj temperaturi (15 minuta), uklonite prethodno premazanu reakciju

treba ukrcati i raspakovati. Razrijedite koncentrovani rastvor za pranje 1:30 destilovanom ili dejonizovanom vodom za upotrebu.

2. Razrjeđivanje uzorka: Razrijedite uzorak koji se testira sa razrjeđivačem za uzorak 1:100 (uzorak 2uL---uzorak

Razblaživač 200uL), dobro promešati (ili razblažiti direktno u otvoru ploče, odnosno dodati 200ul razblaživača uzorka u bunar ploče, dodati 2ul uzorka i promešati).

3. Dodajte uzorak: Dodajte 100uL razrijeđenog uzorka u bunar ploče (ako je razrijeđen u udubini ploče, ovaj korak nije potreban

korak). Postavite negativnu i pozitivnu kontrolu (100 uL/jažici, nerazrijeđeno) u svaku jažicu i postavite praznu kontrolnu jažicu

(Dodajte 100 uL razblaživača uzorka), protresite i promiješajte.

4. Inkubacija: 30 minuta na 37 stepeni. Otresite tečnost u jažici, operite ploču 3 puta rastvorom za pranje, svaki put

Nakon što ostanete 30 sekundi, otresite tečnost u rupi i osušite je na upijajućem papiru.

5. Dodajte enzimski konjugat: 2 kapi (ili 100 uL) po otvoru, dobro promiješajte i inkubirajte na 37 stepeni 20 minuta. Operite 3 puta kao gore i osušite.

6. Razvoj boje: dodajte kap razvijača boje A i B (ili po 50 uL) u svaku jažicu, protresite i dobro promiješajte, postavite na 37

Inkubirajte 10 minuta.